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人胎盘碱性磷酸酯酶基因在鸡蛋蛋清中的表达
引用本文:刘影,陈立侨,王维荣,闵太善,黄伟达.人胎盘碱性磷酸酯酶基因在鸡蛋蛋清中的表达[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2007,28(2):28-31.
作者姓名:刘影  陈立侨  王维荣  闵太善  黄伟达
作者单位:1. 上海农林职业技术学院,上海,201600
2. 华东师范大学,生命科学学院,上海,200062
3. 复旦大学,生命科学学院,上海,200433
基金项目:上海市重大基础专项课题(06DJ14003)
摘    要:利用PCR方法从pSEAP2-control质粒中扩增获得人胎盘碱性磷酸酯酶基因plap的cDNA,将其克隆到鸡输卵管特异性表达载体(pAB-Sig-SV40)的卵清蛋白基因调控区下游。通过脂质体精子载体法人工授精母鸡,收集鸡蛋、孵化。雏鸡出壳后,抽提鸡冠基因组DNA,采用PCR方法检测两组孵化后代中的嵌合体鸡,第1组母鸡(95羽)中plap的PCR阳性检出率为75%,第2组母鸡(128羽)的阳性检出性率为81%。经Western blotting检测,仅1只嵌合体母鸡所产鸡蛋蛋清中检测到plap产物的存在。

关 键 词:嵌合体鸡  输卵管组织特异表达载体  人胎盘碱性磷酸酯酶  表达
文章编号:1671-4652(2007)02-0028-04
修稿时间:2007年3月12日

Expression of human placental alkaline phosphatase in hen egg white
LIU Ying,CHEN Li-qiao,WANG Wei-rong,MIN Tai-shan,HUANG Wei-da.Expression of human placental alkaline phosphatase in hen egg white[J].Journal of Yangzhou University:Agricultural and Life Science Edition,2007,28(2):28-31.
Authors:LIU Ying  CHEN Li-qiao  WANG Wei-rong  MIN Tai-shan  HUANG Wei-da
Abstract:The coding sequence of the gene for human placental alkaline phosphatase(PLAP)was amplified from the pSEAP2-control plasmid by polymerase chain reaction(PCR).The plap gene as a reporter gene was cloned in-frame into chick oviduct tissue-specific expression vector(pAB-Sig-SV40).The recombinant plasmid pAB-Sig-plap-SV40 was used to generate chimeric chicken by using sperm-mediated gene transfer technique.Positive rate of transgene of two groups by PCR are 75% and 81%(histone was added to liposome)respectively.Western blotting showed that the recombinant PLAP had a correct molecular weight of 63 ku.This result indicated that PLAP was expressed and secreted into egg white.
Keywords:chimeric chicken  oviduct tissue specific expression  PLAP  expression
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