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| 牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat6融合基因的分子克隆及表达 | |
| 引用本文： | 迟磊,刘思国,王春来,宫强,赵昆,王勇,刘建东,云孟克,赵福广.牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat6融合基因的分子克隆及表达[J].中国预防兽医学报,2007,29(8):588-590. |
| 作者姓名： | 迟磊 刘思国 王春来 宫强 赵昆 王勇 刘建东 云孟克 赵福广 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;吉林农业大学,生物技术学院,吉林,长春,130118 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 吉林农业大学,生物技术学院,吉林,长春,130118 |
| 摘 要： | 以牛分枝杆菌valleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增mpb64、ag85b和esat6 3个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术（SOE）和基因重组技术获得融合基因mpb64-ag85b,将mpb64-ag85b和esat6串联到同一原核表达载体pET32a（＋）中获得重组质粒pET64-85b-e6。将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）中,以IPTG（终浓度1 mmol/L）进行诱导,SDS-PAGE电泳分析表达情况,以Ni^2＋亲和层析柱纯化表达的融合蛋白和Western blot分析融合蛋白的免疫活性。结果表明：表达的融合蛋白大约为76 Ku,与预测大小相符,以Ni^2＋亲和层析柱纯化的融合蛋白能与牛结核病阳性血清发生反应。 |
| 关 键 词： | 牛分枝杆菌 融合基因 重组表达 |
| 文章编号： | 1008-0589（2007）08-0588-03 |
| 修稿时间： | 2006-11-15 |
Cloning and expression of mpb64-ag85b-esat6 fusion gene of Mycobacterium bovis in E.coli |
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| CHI Lei,LIU Si-guo,WANG Chun-lai,GONG Qiang,ZHAO Kun,WANG Yong,LIU Jian-dong,YUN Meng-ke,ZHAO Fu-guang.Cloning and expression of mpb64-ag85b-esat6 fusion gene of Mycobacterium bovis in E.coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2007,29(8):588-590. | |
| Authors: | CHI Lei LIU Si-guo WANG Chun-lai GONG Qiang ZHAO Kun WANG Yong LIU Jian-dong YUN Meng-ke ZHAO Fu-guang |
| Institution: | 1. Division of Bacterial Diseases, National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001, China; 2. Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Mycobacterium bovis fusion gene recombinant expression |
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