草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备 |
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引用本文: | 王晶,王耀,王方雨,胡骁飞,姚静静,邓瑞广,侯玉泽,张改平. 草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备[J]. 核农学报, 2017, 31(1). DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2017.01.0194 |
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作者姓名: | 王晶 王耀 王方雨 胡骁飞 姚静静 邓瑞广 侯玉泽 张改平 |
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作者单位: | 1. 河南科技大学食品与生物工程学院/畜禽疫病诊断与食品安全检测河南省工程实验室,河南洛阳471023;河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;2. 河南科技大学食品与生物工程学院/畜禽疫病诊断与食品安全检测河南省工程实验室,河南洛阳,471023;3. 河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州,450002 |
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摘 要: | 为检测小分子农药草甘膦(PMG)的残留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl)glycine PMG]人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法将PMG分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;经紫外扫描、SDS-PAGE电泳、质谱鉴定后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清;利用间接ELISA法测定多抗血清效价,竞争ELISA测定多抗血清的敏感性和特异性。结果表明,所合成的免疫抗原效果较好,免疫的4只小鼠效价均达1∶104以上,4号小鼠的多抗血清敏感性最高,半数抑制浓度IC50为31.4μg·m L-1,与其他有机磷类农药无交叉反应,具备良好的特异性。本试验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的鼠源多抗血清,为PMG单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
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关 键 词: | 草甘膦 人工抗原 多抗血清 ELISA |
Preparation of Glyphosate Artifical Antigen and Mice Polyclonal Antiserum |
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Abstract: | |
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Keywords: | glyphosate artificial antigen polyclonal antiserum ELISA |
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