水稻中SAPK8/9/10与OsRbohB/E蛋白互作在ABA诱导H_2O_2产生中的作用

目的]本文旨在验证水稻中SAPK8/9/10与OsRbohB/E蛋白的互作及其在ABA诱导的H_2O_2产生中的作用。方法]先采用酵母双杂交系统进行初步的SAPK8/9/10与OsRbohB/E蛋白的互作分析,然后采用双分子荧光互补(Bi FC)、GST-pull down和体外磷酸化技术验证其互作。为了进一步探讨SAPKs与OsRbohs在ABA信号转导中的作用,采用水稻原生质体瞬时体系分析ABA处理时SAPKs与OsRbohs对H_2O_2产生的影响。结果]SAPK8/9/10与OsRbohB和OsRbohE在体内、外存在相互作用,且OsRbohs是SAPKs磷酸化的底物。与对照组相比,水稻原生质体瞬时过表达SAPK9/10(SAPKs-OE)和OsRbohB/E(OsRbohs-OE)组中H_2O_2的产生明显增加,且ABA处理后增加趋势增强;瞬时沉默SAPKs(ds-SAPKs)和OsRbohs(ds-OsRbohs)组中H_2O_2的产生明显下调,且ABA诱导的H_2O_2增加在这些原生质体中也均被抑制;SAPKs-OE+ds-OsRbohs、ds-SAPKs+OsRbohs-OE组中H_2O_2的产生表现出不同程度的减少。结论]SAPKs与OsRbohs共同参与调节ABA诱导的H_2O_2的产生。