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利用VIGS技术研究广藿香醇合酶基因PatPTS的功能
引用本文:靳巧春,于放,于宗霞,冯宝民.利用VIGS技术研究广藿香醇合酶基因PatPTS的功能[J].中国农业科技导报,2018,20(3):39-45.
作者姓名:靳巧春  于放  于宗霞  冯宝民
作者单位:1.大连大学生命科学与技术学院, 辽宁 大连 116622; 2.大连工业大学生物工程学院, 辽宁 大连 116034
基金项目:国家自然科学基金项目(31540006,31270398,31700267);植物分子遗传国家重点实验室和辽宁省博士科研启动基金项目(201501195)资助。
摘    要:广藿香精油主要存贮在植物地上组织的盾状腺毛中。提取广藿香(马来西亚品系)叶片的总RNA后,通过PCR技术扩增得到广藿香醇合酶基因(PatPTS)的全长cDNA序列,共编码552个氨基酸,与GenBank中已报道的印度广藿香中广藿香醇合酶的氨基酸序列存在3.6%的差异。使用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV),选取PatPTS作为沉默目的基因,在广藿香中构建病毒诱导基因沉默(VIGS)体系,进一步利用该体系在广藿香中鉴定PatPTS基因的功能。病毒侵染广藿香叶片后,分别选取不同的时间点,使用GS-MS与qRT-PCR检测PatPTS催化产物和转录水平的变化,结果发现:β-广藿香烯、β-榄香烯、石竹烯、广藿香醇等倍半萜成分的含量在VIGS侵染后第2周明显下降,1周和3周效果不明显;PatPTS转录本下降趋势与其调控的倍半萜含量变化趋势类似;表明PatPTS基因负责了广藿香精油主要倍半萜成分的合成。说明广藿香中VIGS体系已初步建立,并在侵染植物2周后诱导基因沉默和干扰次生代谢产物合成的效果最好,为在广藿香中快速研究基因功能打下基础。

关 键 词:VIGS  广藿香  广藿香醇合酶  倍半萜类化合物    
收稿时间:2017-05-08

Functional Characterization of PatPTS Gene Using Virus Induced Gene Silencing (VIGS) System in Patchouli (Pogostemon cablin)
JIN Qiaochun,YU Fang,YU Zongxia,FENG Baomin.Functional Characterization of PatPTS Gene Using Virus Induced Gene Silencing (VIGS) System in Patchouli (Pogostemon cablin)[J].Journal of Agricultural Science and Technology,2018,20(3):39-45.
Authors:JIN Qiaochun  YU Fang  YU Zongxia  FENG Baomin
Institution:1.School of Life Science and Technology, Dalian University, Liaoning Dalian 116622; 2.School of Biological Engineering, Dalian Polytechnic University, Liaoning Dalian 116034, China
Abstract:
Keywords:VIGS  Pogostemon cablin  PatPTS  sesquiterpenes    
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