ASAP1调节巨噬细胞对结核分枝杆菌吞噬作用的研究

目的]结核病是全球最重要的人畜共患传染病之一,Arf核糖激化因子GTP酶活化蛋白(ASAP1)与结核病易感性相关。本文旨在明确在细胞水平ASAP1表达与结核分枝杆菌感染的关系,探究ASAP1是否参与巨噬细胞对Mycobacterium tuberculosis(Mtb)的吞噬以及了解该蛋白表达对巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌的影响。方法]以人源单核细胞建立的不同ASAP1表达水平的巨噬细胞作为模型,通过感染结核分枝杆菌开展了一系列体外试验,使用BCG和Mtb H37Ra菌株感染THP-1分化的巨噬细胞,Western blot以及荧光定量PCR检测感染后ASAP1的表达;建立不同ASAP1表达水平的巨噬细胞,进一步研究ASAP1对巨噬细胞吞噬Mtb H37Ra的调节作用;利用Mtb H37Ra感染不同表达ASAP1的巨噬细胞,通过细菌菌落计数及细胞免疫荧光试验,检测ASAP1表达水平与巨噬细胞吞噬Mtb H37Ra的关系。结果]Mtb H37Ra感染诱导ASAP1表达上调,BCG感染不能诱导ASAP1表达上调,说明ASAP1参与了巨噬细胞对Mtb H37Ra的吞噬作用;利用Mtb H37Ra感染不同ASAP1表达水平的巨噬细胞,证实ASAP1低水平表达的巨噬细胞对Mtb H37Ra吞噬能力减弱,高水平表达的巨噬细胞对Mtb H37Ra的吞噬能力增强,ASAP1表达水平与巨噬细胞对Mtb H37Ra的吞噬能力呈正相关。结论]Mtb感染能诱导ASAP1高水平表达,ASAP1参与巨噬细胞对Mtb吞噬,并通过该蛋白表达对巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌进行调控,ASAP1的超高水平表达可诱导巨噬细胞对Mtb过多地吞噬。