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| 猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01分离株神经氨酸酶基因的克隆及真核表达 | |
| 引用本文： | 赵朴,李海燕,杨焕良,陈化兰,于康震,卢中华. 猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01分离株神经氨酸酶基因的克隆及真核表达[J]. 中国预防兽医学报, 2005, 27(1): 1-4 |
| 作者姓名： | 赵朴 李海燕 杨焕良 陈化兰 于康震 卢中华 |
| 作者单位： | 1. 中国农业农业科学院,哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物技术国家重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨 150001;全国畜牧兽医总站,北京,100026 2. 中国农业农业科学院,哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物技术国家重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨 150001 3. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002 |
| 基金项目： | 兽医生物技术国家重点实验开放基金 |
| 摘 要： | 根据GenBank中登录的猪流感病毒参照序列设计了扩增神经氨酸酶(NA)基因的特异性引物.从猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01(H3N2)株感染的鸡胚液中直接提取病毒RNA,经RT-PCR扩增后将其克隆到pMD18-T载体上,进行序列测定和拼接.用HindⅢ酶切后,亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上,得到重组转移载体pMelBacNA,然后与线性化杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染于sf9昆虫细胞.经3轮噬斑纯化,提取其DNA经PCR鉴定,获得重组杆状病毒株.SDS-PAGE结果显示,目的基因已获得表达,Western blot和神经氨酸酶活性检测结果显示表达产物具有良好的免疫原性和神经氨酸酶活性,为SIV亚单位疫苗和NA基因的深入研究奠定了基础. |
| 关 键 词： | 猪流感病毒 神经氨酸酶基因 克隆 重组杆状病毒 表达 |
| 文章编号： | 1008-0589(2005)01-0001-04 |
| 修稿时间： | 2003-08-25 |
Cloning and expressing in the baculovirus expression system of NA gene of A/Swine/Inner Mongolia/547/01 isolate |
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| ZHAO Pu. Cloning and expressing in the baculovirus expression system of NA gene of A/Swine/Inner Mongolia/547/01 isolate[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2005, 27(1): 1-4 | |
| Authors: | ZHAO Pu |
| Abstract: | |
| Keywords: | swine influenza virus NA gene cloning recombinant baculovirus expression |
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