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PRSV NIa-pro、NIa-vpg、NIb酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测
引用本文:王明钦,沈文涛,周鹏.PRSV NIa-pro、NIa-vpg、NIb酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测[J].热带作物学报,2008,29(3):369-373.
作者姓名:王明钦  沈文涛  周鹏
作者单位:中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所
基金项目:国家自然科学基金项目 , 中央级科研院所基本科研业务费项目资助
摘    要:用PCR技术获得NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,将这些基因分别克隆到pBD-GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD-GAL4-NIa-pro、pBD-GAL4-NIa-vpg和pBD-GAL4-NIb.测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用.结果表明,获得了正确的NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,并成功克隆到pBD-GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,为下一步利用酵母双杂交系统检测与NIa-pro、NIa-vpg、NIb蛋白相互作用的蛋白奠定基础.

关 键 词:PRSV  酵母双杂交  诱饵载体  构建  检测

Construction and Identification of Bait Vector Containing PRSV NIa-pro/NIa-vpg/NIb Gene in Yeast Two-hybrid System
Wang Mingqin,Shen Wentao and Zhou Peng.Construction and Identification of Bait Vector Containing PRSV NIa-pro/NIa-vpg/NIb Gene in Yeast Two-hybrid System[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2008,29(3):369-373.
Authors:Wang Mingqin  Shen Wentao and Zhou Peng
Institution:Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS
Abstract:
Keywords:PRSV  yeast two-hybrid  bait vector  construction  identification
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