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西尼罗病毒糖蛋白第三结构域的原核表达及鉴定
作者单位:
;1.解放军军事医学科学院军事兽医研究所/吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室;2.吉林大学动物医学学院
摘 要:
根据西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)序列设计1对特异性引物,用PCR反应扩增糖蛋白第三结构域(WNVEDⅢ)基因,将PCR产物克隆至pGEX-4T-1原核表达载体上,获得重组表达质粒,将该质粒转化入E.coli DH5α,命名为pG-EDⅢ,鉴定正确后转入transetta表达菌中,经IPTG诱导后纯化重组蛋白,通过SDS-PAGE和Western-blot方法证实WNV-EDⅢ基因可在大肠杆菌中高效表达,小鼠免疫试验证明该原核表达蛋白有良好的免疫原性。
关 键 词:
西尼罗病毒
糖蛋白第三结构域(EDⅢ)
原核表达
免疫原性
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