| 人白介素-2基因打靶载体的构建、转染及鉴定 |
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| 引用本文： | 王韵斐,陈秋菊,杨莎,崔易虹,杨明明,曹斌云. 人白介素-2基因打靶载体的构建、转染及鉴定[J]. 中国农业大学学报, 2011, 16(5): 82-87 |
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| 作者姓名： | 王韵斐 陈秋菊 杨莎 崔易虹 杨明明 曹斌云 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划项目资助(2007AA10Z167); 陕西省13115重大科技创新专项(2009ZDKG-1a) |
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| 摘 要： | 为研究人白介素2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达，构建人白介素-2基因的山羊β-酪蛋白位点打靶载体。以质粒pBCI为模板扩增山羊β-酪蛋白上游2．5kb和下游3．5kb的序列作为5’和3’同源臂，将克隆得到的人白介素2基因和neo基因插入到2个同源臂之间，获得山羊β-酪蛋白基因打靶载体pBN153。利用脂质体将重组质粒转染奶山羊胎儿成纤维细胞进行G418筛选，并采用PCR和实时定量PCR方法对人白介紊-2基因在稳定株中的表达进行验证。检测结果表明，本试验构建的打靶裁体pBN153成功转染奶山羊胎儿成纤维细胞，将人白介素2基因成功整合至奶山羊胎儿成纤维细胞基因组中，为通过体细胞核移植法制备人白介素-2基因乳腺生物反应器的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人白介素-2 β-酪蛋白 基因打靶 乳腺生物反应器 |
| 收稿时间： | 2011-03-03 |
Construction,transfection and identification of human IL-2gene targeting vector |
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| WANG Yun-fei,CHEN Qiu-ju,YANG Sh,CUI Yi-hong,YANG Ming-ming and CAO Bin-yun. Construction,transfection and identification of human IL-2gene targeting vector[J]. Journal of China Agricultural University, 2011, 16(5): 82-87 |
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| Authors: | WANG Yun-fei CHEN Qiu-ju YANG Sh CUI Yi-hong YANG Ming-ming CAO Bin-yun |
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| Affiliation: | WANG Yun-fei,CHEN Qiu-ju,YANG Sha,CUI Yi-hong,YANG Ming-ming,CAO Bin-yun(College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human interleukin-2 β-casein gene targeting mammary gland bioreactor |
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