| 苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性 |
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| 引用本文： | 崔婷婷,杜立新,彭 琦,张 杰,高继国,宋福平.苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性[J].植物保护,2019,45(1):30-36. |
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| 作者姓名： | 崔婷婷 杜立新 彭 琦 张 杰 高继国 宋福平 |
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| 作者单位： | 1. 东北农业大学生命科学学院, 哈尔滨 150030; 2. 中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193; 3. 河北省农林科学院植物保护研究所, 保定 071000 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2017YFD0200400); 国家自然科学基金重点基金(31530095) |
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| 摘 要： | 本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E。分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性。本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件。
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| 关 键 词： | 苏云金芽胞杆菌 cry基因启动子 转录活性 Cry晶体蛋白 晶体蛋白表达 |
| 收稿时间： | 2018/3/30 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/4/26 0:00:00 |
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