农杆菌介导黎平杂边禾优化遗传转化体系的研究

为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,建立黎平杂边禾遗传转化体系。本研究以贵州地方水稻品种黎平杂边禾茎尖为材料,遗传转化苦瓜几丁质酶基因McCHIT1,以β-葡萄糖苷酶基因(GUS)作为报告基因,通过正交试验设计方法,研究菌液OD_(600)值、真空处理时间和真空渗透压强对黎平杂边禾茎尖遗传转化体系的影响。结果表明:影响植株GUS基因表达率和植株死亡率的主要因素分别为真空处理时间和菌液浓度;农杆菌介导黎平杂边禾茎尖遗传转化的最优条件是真空处理时间为11 min、农杆菌菌液OD_(600)为0.8和真空渗透压强为8kPa。通过优化影响遗传转化体系的条件,初步建立了建立黎平杂边禾遗传转化体系。