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BMP4基因原核表达及优化
引用本文:周建设,李 明,陈其新,张 驰,石晓卫,赵巧辉.猪BMP4基因原核表达及优化[J].西北农业学报,2011,20(1):24-28.
作者姓名:周建设  李 明  陈其新  张 驰  石晓卫  赵巧辉
作者单位:1. 河南农业大学,郑州,450002
2. 新乡医学院,河南新乡,453003
3. 郑州安图绿科生物工程有限公司,郑州,450016
基金项目:河南省重点科技攻关项目(82102130004); 河南农业大学博士基金(30300338)
摘    要:构建猪BMP4基因pET32a-BMP4原核表达质粒,在E.coli中表达并分离纯化目的蛋白。采用PCR技术以pMD18-T-BMP4重组质粒为模板扩增获得BMP4基因编码成熟肽片段,并插入到原核表达载体pET32a中,构建原核表达重组质粒pET32a-BMP4。将阳性重组质粒转化到表达宿主菌中,在不同的温度、IPTG浓度和时间下进行诱导表达,SDS-PAGE分析鉴定。构建的重组表达质粒经PCR、酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,表达宿主菌经IPTG诱导表达分子量约为31 ku的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的30%以上。成功构建了pET32a-BMP4原核表达质粒,并经纯化得到BMP4目的蛋白,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。

关 键 词:  骨形态发生蛋白4  原核表达  条件  

Prokaryotic Expression and Optimization of Bone Morphogenetic Protein 4 from Pigs
ZHOU Jianshe,LI Ming,CHEN Qixin,ZHANG Chi,SHI Xiaowei and ZHAO Qiaohui.Prokaryotic Expression and Optimization of Bone Morphogenetic Protein 4 from Pigs[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2011,20(1):24-28.
Authors:ZHOU Jianshe  LI Ming  CHEN Qixin  ZHANG Chi  SHI Xiaowei and ZHAO Qiaohui
Institution:ZHOU Jianshe1,LI Ming1,CHEN Qixin1,ZHANG Chi1,SHI Xiaowei2 and ZHAO Qiaohui3(1.Henan Agricultural University,Zhengzhou 450002,China,2.Xinxiang Medical University,Xinxiang Henan 453003,3.Zhengzhou Autobio Diagnostics Co.Ltd.,Zhengzhou 450016,China)
Abstract:
Keywords:Pig  BMP4  Prokaryotic expression  Condition  
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