玉米纹枯病病菌γ-谷氨酰转肽酶基因克隆与表达分析 |
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作者姓名: | 刘博 孔婷婷 刘限 高增贵 姚远 唐琳 何世道 |
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作者单位: | 沈阳农业大学植物免疫研究所,辽宁沈阳,110866 |
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基金项目: | 国家科技支撑计划(编号2012BAD04B03、2013BAD07B03);辽宁省农业科技创新团队项目(编号2014201003)。 |
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摘 要: | 前期利用In-Fusion SMARTer TM c DNA Library Construction Kit已完成玉米纹枯病菌WF-9菌株的全长c DNA文库,并进行EST分析。笔者在此基础上,将EST片段进行聚类拼接,得到一个长944 bp的序列,根据所得序列开放阅读框设计引物,克隆得到玉米纹枯病病菌γ-谷氨酰转肽酶基因(GGT)c DNA序列,以生物信息学方法对其序列进行预测分析,并利用real-time PCR分析GGT在立枯丝核菌侵染玉米叶片不同时期的表达特性。结果表明,克隆所得617 bp序列与EST序列完全相同,在Gen Bank进行Blastx同源比对,与gamma-glutamyltranspeptidase(Rhizoctonia solani AG-3 Rhs1AP)有85%的同源性。实时荧光定量PCR表明,GGT在立枯丝核菌侵染玉米叶片各个时期均有表达,并存在明显差异,其中在病菌侵染玉米叶片24 h时表达量最高。
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关 键 词: | 立枯丝核菌 GGT 基因克隆 表达分析 |
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