新城疫病毒JZ05株F基因重组pGAPZα的构建 |
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引用本文: | 程太平,刘超,荣俊.新城疫病毒JZ05株F基因重组pGAPZα的构建[J].湖北农业科学,2009,48(11). |
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作者姓名: | 程太平 刘超 荣俊 |
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作者单位: | 1. 长江大学动物科学学院,湖北荆州,434025 2. 长江大学生命科学学院,湖北荆州,434025 |
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基金项目: | 湖北省教育厅科学研究计划项目 |
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摘 要: | 以RT-PCR扩增新城疫病毒JZ05株,基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶κpnI和XbaI对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化Eacterium coli DH5α.以PCR方法确定JZ05 F1的阳性重组子为2个,JZ05 F2的阳性重组子为4个.对阳性重组子进行酶切鉴定及序列分析,结果发现,重组质粒pGAPZαA-F1、pGAPZαA-F2及质粒pGAPZαA的酶切电泳条带与试验设计大小相符;基因测序得到的重组子中F1和F2序列长度分别为1198bp、269bp,与新域疫病毒JZ05株F基因序列比对,其序列长度和核苷酸排列完全一致.这表明重组质粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正确的,为以酵母表达系统表达F1和F2、研究强毒株与弱毒株F蛋白的抗原性差异程度及研制重组亚单位疫苗打下了基础.
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关 键 词: | 新城疫病毒 F基因 质粒pGAPZeta 重组 plasmid pGAPZαA |
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