茄子基因组DNA提取及ISSR-PCR反应体系的优化 |
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引用本文: | 毛伟海,杜黎明,包崇来,胡天华,朱琴妹,胡海娇.茄子基因组DNA提取及ISSR-PCR反应体系的优化[J].农业生物技术学报,2007,15(4). |
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作者姓名: | 毛伟海 杜黎明 包崇来 胡天华 朱琴妹 胡海娇 |
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摘 要: | 为了应用ISSR分子标记对茄子(Solanum melongena L)种资源进行种质鉴定、分类及亲缘关系等方面的研究,本试验以茄子叶片为材料,探索茄子DNA的提取及ISSR反应的最佳体系。结果表明利用改良CTAB法提取DNA,可以消除茄子叶片多糖、多酚、色素等物质的干扰,得到高质量的DNA,完全符合ISSR反应需要。以茄子基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Taq酶、dNTP、引物、模板4种因素3个水平对茄子ISSR反应体系进行优化,建立了一套适宜于茄子的ISSR优化反应体系及程序,为进行茄子遗传多样性的研究奠定了基础。在20μL的反应体系包括:Taq酶1 U,Mg2+2. 5mmol/ L,dNTP 375μmol/ L , 引物浓度0.4μmol/ L,模板DNA 4ng,2μL 10×PCR Buffer(Mg2+)。
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收稿时间: | 2006-8-14 |
修稿时间: | 2006-12-15 |
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