| 禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 包红梅 王秀荣 刘丽玲 王昱 李一经 陈化兰. 禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科技, 2006, 36(9): 701-706 |
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| 作者姓名： | 包红梅 王秀荣 刘丽玲 王昱 李一经 陈化兰 |
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| 作者单位： | [1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 国家事务攻关项目（2002BA514A-18-3） |
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| 摘 要： | 为了能快速准确地对禽流感进行病原学诊断，根据流感病毒的M基因序列，在保守区内用Olig04．0软件设计了1对引物，建立了一步法RT—PCR诊断方法，其目的片段大小为229bp。通过对不同稀释倍数的H5亚型禽流感病毒尿囊液和棉拭子浸出液进行检测，结果显示，病毒尿囊液的最低检出稀释度为1：10^4；阳性棉拭子的最低检出稀释度为1：2^3。用病毒分离法和一步法RT—PCR同时检测人工感染鸡不同脏器、口咽及泄殖腔棉拭子样品，二者符合率为100％，但前者的检测灵敏度比后者高10～100倍。用该方法检测H1～H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原，所有禽流感病毒均有229bp的目的条带出现，而其他14种禽病病原均无目的条带出现，表明该方法的特异性好。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 一步法RT—PCR 快速诊断 |
| 文章编号： | 1673-4696（2006）09-0701-06 |
| 收稿时间： | 2006-04-05 |
| 修稿时间： | 2006-08-01 |
Development of a one-step RT-PCR assay for detection of A subtype avian influenza virus |
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| BAO Hong-mei , WANG Xiu-rong ,LIU Li-ling ,WANG Yu , LI Yi-jing , CHEN Hua-lan. Development of a one-step RT-PCR assay for detection of A subtype avian influenza virus[J]. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology, 2006, 36(9): 701-706 |
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| Authors: | BAO Hong-mei WANG Xiu-rong LIU Li-ling WANG Yu LI Yi-jing CHEN Hua-lan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | avian influenza virus one-step RT-PCR diagnoses expeditiousness |
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