贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis YB15β-葡聚糖酶的抑菌作用与基因克隆

本文在对峙法验证贝莱斯芽孢杆菌B. velezensis YB15具抑菌作用的基础上，用透明圈法、DNS法研究其产β-葡聚糖酶特性，利用对峙法验证该酶抑菌作用，通过PCR法获得目的基因，分析克隆序列并预测其蛋白质结构与功能。结果表明，该菌株对多种病原真菌有拮抗作用，杨树紫纹羽病菌拮抗带达11.0 mm，该菌提取的葡聚糖酶粗酶液对杨树紫纹羽病菌抑菌带为10.6 mm，说明葡聚糖酶在菌株YB15抑菌中有重要作用。不同接种方法影响菌株YB15葡聚糖酶水解透明圈形成，点种法水解圈与菌落直径之比在72 h可达14.1，效果最好。克隆所得菌株YB15葡聚糖酶基因命名为Bglu1，该基因序列长732 bp，编码243个氨基酸，此酶蛋白氨基酸序列与解淀粉芽孢杆菌TB2β-1,3-1,4-葡聚糖酶同源性较高，属糖基水解酶16家族，N端疏水区存在信号肽并具跨膜区域，推测其为分泌蛋白。