| 环丙沙星单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 贾杰只,陈晓丹,雷 洁. 环丙沙星单克隆抗体的制备[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2011, 39(9): 35-40 |
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| 作者姓名： | 贾杰只 陈晓丹 雷 洁 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物科技学院;珠海市英平生物科技有限公司;西北农林科技大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 陕西省“13115”科技创新重大专项（2009ZDKG-18） |
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| 摘 要： | 【目的】制备环丙沙星(Crprofloxacin,CPFX)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并对其免疫学特性进行鉴定,为畜产品CPFX残留的快速检测提供技术支持。【方法】采用碳二亚胺法(EDC),将载体蛋白牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)和鸡卵白蛋白(ovalbumin,OVA)分别与CPFX偶联合成免疫抗原CPFX-BSA和包被抗原CPFX-OVA,经紫外(UV)扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术筛选分泌CPFX mAb的杂交瘤细胞株,采用体内诱生腹水法制备CPFX mAb,并对其染色体核型、效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。【结果】UV和SDS-PAGE鉴定结果表明,人工抗原偶联成功;免疫的5只小鼠血清抗体效价均达到了1∶105左右,其中4号小鼠血清CPFX抑制效价较高且IC50最低(17.21μg/L),融合后筛选出1株敏感特异的杂交瘤细胞,命名为3D2。3D2细胞培养上清效价为1∶(1.28×103),腹水效价为1∶(1.6×105)。CPFX mAb对CPFX的IC50为9.95μg/L,对恩诺沙星的交叉反应率为128.39%,与其他同系的喹诺酮类抗生素的交叉反应率很低。【结论】获得了高效价、敏感、特异的抗CPFX mAb,为CPFX残留的快速检测奠定了技术基础。
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| 关 键 词： | 环丙沙星 单克隆抗体 ELISA 杂交瘤 |
| 收稿时间： | 2011-03-03 |
Preparation of the monoclonal antibody against Ciprofloxacin |
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| JIA Jie-zhi,CHEN Xiao-dan,LEI Jie,ZHANG Zhi-ying. Preparation of the monoclonal antibody against Ciprofloxacin[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2011, 39(9): 35-40 |
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| Authors: | JIA Jie-zhi CHEN Xiao-dan LEI Jie ZHANG Zhi-ying |
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| Affiliation: | JIA Jie-zhi1,CHEN Xiao-dan2,LEI Jie1,ZHANG Zhi-ying1(1 College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China,2 Zhuhai Yingping Biotechnology Limited Company,Zhuhai,Guangdong 519000,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ciprofloxacin monoclonal antibody ELISA hybridoma |
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