| 小鼠Dazl基因融合蛋白表达载体的构建及转染 |
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| 引用本文： | 王龙,周莹,胡玥,于萌,白耀富,华进联.小鼠Dazl基因融合蛋白表达载体的构建及转染[J].中国兽医学报,2013,33(2):236-240. |
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| 作者姓名： | 王龙 周莹 胡玥 于萌 白耀富 华进联 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心农业部动物生物技术重点开放性实验室,陕西杨凌,712100
2. 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30972097);教育部重点科研资助项目(109148);教育部优秀人才支持计划资助项目(NCET-09-0654);中国博士后特别科学基金资助项目(200801438) |
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| 摘 要： | 根据NCBI数据库上公布的小鼠Dazl基因的mRNA序列设计引物,以小鼠睾丸组织RNA为模板,RT-PCR扩增小鼠Dazl基因编码区片段,并将其克隆到增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1中,构建重组融合蛋白表达载体pEGFP C1-Dazl,单双酶切和测序验证正确.将pEGFP-Cl-Dazl质粒转染293和NIH 3T3细胞,荧光显微镜下观察到融合表达的绿色荧光蛋白,且呈胞质表达；对照组转染pEGFP-C1,绿色荧光遍布整个细胞.Dazl蛋白的免疫荧光试验也证明重组载体转染后,Dazl基因和GFP共同定位于胞质部分.pEGFP C1-Dazl融合蛋白表达载体的成功构建为进一步研究生殖特异性基因Dazl在小鼠和大型动物的表达特性奠定了一定的基础.
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| 关 键 词： | 小鼠 生殖细胞 Dazl基因 绿色荧光蛋白 |
Construction of eukaryotic expression vector pEGFP-C1-Dazl and its expression in 293 and NIH-3T3 cells |
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| WANG Long,ZHOU Ying,HU Yue,YU Meng,BAI Yao-fu,HUA Jin-lian.Construction of eukaryotic expression vector pEGFP-C1-Dazl and its expression in 293 and NIH-3T3 cells[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2013,33(2):236-240. |
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| Authors: | WANG Long ZHOU Ying HU Yue YU Meng BAI Yao-fu HUA Jin-lian |
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| Institution: | 1(1.Key Laboratory for Animal Biotechnology of Agriculture Ministry of China,Shaanxi Centre of Stem Cells Engineering & Technology,College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China;2.College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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