| 鸡γ-干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 丁忠庆,刘胜旺,孔宪刚,宋铭忻. 鸡γ-干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达及多克隆抗体的制备[J]. 中国兽医学报, 2004, 24(3): 255-257 |
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| 作者姓名： | 丁忠庆 刘胜旺 孔宪刚 宋铭忻 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030
2. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家“8 63”计划项目 ( 2 0 0 1AA2 490 3 2 ) |
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| 摘 要： | 将克隆得到的鸡 IFN- γ基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体 p PROEXTMHT的 Pst 和 Kpn 位点上 ,构建了重组表达质粒 p PROEXTMHT- IFN -γ,经序列分析鉴定 ,确证目的基因克隆入载体的预期位点。将重组质粒转化大肠杆菌 DH5 α,于 37℃不同时间诱导培养 ,SDS- PAGE电泳表明 ,该基因在大肠杆菌中发生高水平表达 ,表达的鸡 IFN- γ融合蛋白相对分子质量约为 2 2 0 0 0。重组蛋白占菌体总蛋白的 33%。经 Western blot鉴定 ,该重组蛋白质具有生物学活性。包涵体被 6 mol/ L 盐酸胍裂解后 ,通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡 IFN- γ融合蛋白及其纯化产物经 3次肌肉注射于新西兰白兔 ,制备了兔抗鸡 IFN- γ多克隆抗体。琼脂扩散结果表明 ,多克隆抗体可与纯化的鸡IFN -γ重组蛋白发生特异性反应
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| 关 键 词： | 鸡IFN-γ 融合蛋白 表达 抗体制备 |
| 文章编号： | 1005-4545(2004)03-0255-03 |
| 修稿时间： | 2003-02-17 |
Expression of Recombinant Chicken IFN-γ in E.coli and Preparation of Antibody against Recombinant Chicken IFN-γ Protein |
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| DING Zhong-qing. Expression of Recombinant Chicken IFN-γ in E.coli and Preparation of Antibody against Recombinant Chicken IFN-γ Protein[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2004, 24(3): 255-257 |
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| Authors: | DING Zhong-qing |
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| Affiliation: | DING Zhong-qing~ |
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