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非生物胁迫下青花菜内参基因的筛选
作者姓名:焦鹏  刘院梅  裴徐梨  冯鹏宇  唐征  荆赞革  李金林  徐谦
作者单位:1. 昆明学院农学与生命科学学院;2. 温州科技职业学院农业与生物技术学院
基金项目:浙江省自然科学基金项目(LY18C150006);;温州市科技项目(2019ZX007-2);
摘    要:【目的】检测非生物胁迫下常见内参基因的表达稳定性,筛选出青花菜的适宜内参基因。【方法】以青花菜高代自交系“KU19-3”为试验材料,利用已有的转录组数据和文献,筛选出31个候选内参基因,对其在不同非生物胁迫下(盐、干旱、渍水、弱光、高温和低温)的表达水平进行荧光定量PCR检测,采用geNorm、Normfinder和BestKeeper软件分析其表达稳定性,从而筛选出适宜的内参基因。【结果】31个候选内参基因的扩增特异性良好,且表达水平差异明显。其中BOL029171的Ct值最小,表达量最大;而BOL001470的Ct值最大,表达量最小。其他基因的Ct值介于20~40。3种软件综合分析结果表明:BOL034565和BOL008820在高温胁迫下最稳定,BOL043724和BOL005937在弱光胁迫下表达稳定性最好,BOL043724和BOL001470、BOL005937和BOL006136分别在低温和盐胁迫下表达最稳定,BOL024326和BOL025875、BOL008820和BOL001788分别在渍水和干旱胁迫处理下表达最稳定。综合上述得出BOL006136和BOL00882...

关 键 词:青花菜  内参基因  实时荧光定量PCR  非生物胁迫
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