多个稻曲病菌效应因子的信号肽验证和表达分析

【目的】信号肽对效应因子的分泌至关重要，影响病原微生物的致病进程。前期鉴定到在稻曲病菌侵染水稻花器官过程中显著上调表达的10个效应因子基因，但这些效应因子是否含有功能性信号肽及其表达模式尚不明确。【方法】利用SignaIP-5.0数据库预测、烟草瞬时表达系统和酵母信号肽分泌实验，分析并鉴定这些效应因子的信号肽。利用实时荧光定量PCR技术，检测效应因子基因的表达模式。【结果】UV＿44、UV＿1548、UV＿1567等10个稻曲病菌效应因子均含有信号肽。烟草瞬时表达结果显示，含有信号肽的eYFP融合蛋白在细胞质壁分离后均能分泌到质外体空间。酵母菌信号肽分泌结果显示，分别携带这10个信号肽的酵母菌株可在以棉子糖为唯一碳源的培养基上生长，且与TTC发生显色反应。实时荧光定量结果表明，除了UV＿6754，其余9个效应因子基因的表达模式不尽相同，其中UV＿44、UV＿1567、UV＿3667、UV＿4213、UV＿4989、UV＿5215和UV＿8184的表达量在接种后显著升高。【结论】这10个稻曲病菌效应因子均含有分泌功能的信号肽，编码效应因子的基因在稻曲病菌侵染过程中具有不同的表达模式。该结...