| SYBR Green实时荧光定量PCR检测水牛体细胞组蛋白乙酰化相关基因mRNA表达 |
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| 作者姓名： | 罗婵 王志强 公方强 石德顺 |
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| 作者单位： | 广西大学,动物繁殖研究所,广西,南宁,530005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 以检测水牛成纤维细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT1)和脱乙酰化酶(HDAC1)转录活性为例,对SYBRGreen实时荧光定量PCR技术平台的建立进行了探讨.结果显示,适宜的引物,高质量RNA反转录得到的cDNA以及合适的PCR体系为SYBR Green实时荧光定量PCR能否成功的关键因素.本试验中3对引物的灵敏度高,其反应性能完全满足SYBR Green实时荧光定量PCR的要求.2个目的基因HAT1、HDAC1的扩增效率与参照基因H2A接近,试验结果可用2-△△Ct计算法进行分析.当cDNA模板量为0.5 μL(相当于总RNA 50 ng),引物为1 μmol/L时,SYBR Green实时荧光定量PCR能高效获得特异性强的目的产物.
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| 关 键 词： | 实时荧光定量PCR 组蛋白乙酰化/去乙酰化 mRNA表达水平检测 |
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