| 坎氏弧菌热不稳定溶血素基因的克隆表达、蛋白纯化及其活性 |
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| 引用本文： | 孙婧,孙铂光,贾爱荣,张晓华.坎氏弧菌热不稳定溶血素基因的克隆表达、蛋白纯化及其活性[J].中国水产科学,2010,17(4). |
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| 作者姓名： | 孙婧 孙铂光 贾爱荣 张晓华 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学,海洋生命学院,山东,青岛,266003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金委与香港研究资助局(NSFC-RGC)联合科研基金项目，教育部科学技术研究重点项目 |
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| 摘 要： | 坎氏弧菌(Vibrio campbellii)是水产养殖动物的重要致病茵.本研究构建了坎氏弧菌热不稳定溶血素(TLH)基因的重组表达质粒pET2610(+)/tlh,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达带有6个组氨酸的TLH融合蛋白,然后利用Ni琼脂糖亲和层析柱进行纯化.SDS-PAGE分析显示,该溶血素能够大量表达,分子量约为42 kD.纯化的TLH(0.41mg/mL)具有较强的溶血活性(溶血圈直径为16 mm)及磷脂酶活性(晕圈直径为15 mm).其溶血活力的最适温度为37℃,在75℃下培养30 min即丧失活力;最适pH为6,pH大于或小于6时都会导致其稳定性下降;一价金属离子如Na+、K+对溶血活性几乎没有影响,而部分二价金属离子如Ca2+、Co2+会导致溶血活性降低.本研究结果对阐明坎氏弧菌的致病机理及基因工程疫苗开发有重要意义.
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| 关 键 词： | 坎氏弧菌 溶血素 表达 蛋白纯化 溶血活性 |
| 修稿时间： | 2010/7/21 0:00:00 |
Expression, purification and characterization of Vibrio campbellii hemolysin(TLH) |
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| SUN Jing,SUN Boguang,JIA Airong,ZHANG Xiaohua.Expression, purification and characterization of Vibrio campbellii hemolysin(TLH)[J].Journal of Fishery Sciences of China,2010,17(4). |
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| Authors: | SUN Jing SUN Boguang JIA Airong ZHANG Xiaohua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TLH |
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