| 小麦Pinb基因启动子区CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建 |
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| 引用本文： | 张淑娟,张荣志,宋国琦,李玉莲,高洁,李玮,高世庆,李根英.小麦Pinb基因启动子区CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建[J].山东农业科学,2020,52(1):1-9. |
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| 作者姓名： | 张淑娟 张荣志 宋国琦 李玉莲 高洁 李玮 高世庆 李根英 |
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| 作者单位： | 山东省农业科学院作物研究所/农业部黄淮北部小麦生物学与遗传育种重点实验室/小麦玉米国家工程实验室,山东 济南 250100;北京杂交小麦工程技术研究中心,北京 100097 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育科技重大专项;农业科技创新工程项目;山东省农业良种工程项目;国家重点研发计划 |
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| 摘 要： | CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术已经逐渐成熟并在多种植物中得到成功应用,促进了基因功能的研究。小麦籽粒硬度是决定小麦加工品质的重要性状,Pinb是控制籽粒硬度的关键基因之一。本研究以小麦Pinb基因为对象,联合采用常规PCR和Golden Gate cloning技术,构建了包含小麦Pinb基因启动子区双靶点的CRISPR/Cas9基因编辑载体。将重组载体转入小麦原生质体中进行sgRNA活性的检测,在两个靶点位置均发生了突变,编辑效率分别为4. 57%和4. 37%,基因编辑类型包括碱基替换和碱基缺失。该研究为在小麦中实现Pinb基因的定点突变奠定了基础,对其功能研究和小麦品质改良均具有重要意义。
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| 关 键 词： | 小麦 CRISPR/Cas9 基因编辑 Pinb基因 |
Construction of Promoter Region CRISPR/Cas9 Genome Editing Vector of Pinb Gene in Wheat |
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