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牛白细胞介素18成熟蛋白cDNA基因的克隆和表达
引用本文:刘文强,胡敬东,杨少华,赵宏坤,高运东,仲跻峰.牛白细胞介素18成熟蛋白cDNA基因的克隆和表达[J].畜牧兽医学报,2005,36(9):873-876.
作者姓名:刘文强  胡敬东  杨少华  赵宏坤  高运东  仲跻峰
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
2. 山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100
3. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100
基金项目:国家“十五”乳业重大科技专项(2002BASl8A16);山东省“三0”工程基金(2003-3009)
摘    要:应用RT—PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的牛脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码牛白细胞介素(bIL)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480bp。将bIL-18克隆到pET32a(+)质粒中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析.得到了分子量为38ku的融合蛋白,该蛋白经纯化并复性后,具有诱导MDBK分泌IFN-γ的活性,并且可以刺激ConA活化的外周血单核细胞(PBMC)增殖。使用半定量RT—PCR对其mRNA的体内表达进行了测定,发现不论是否加入刺激剂,牛巨噬细胞都可以持续的表达IL-18 mRNA,但是被LPS活化的PBMC只有微弱表达,肝和脾细胞经LPS活化后也可以检测到IL-18 mRNA的表达,其水平明显高于PBMC,在不同细胞中表达的差异可能反映了其产生成熟IL-18的能力。

关 键 词:  白细胞介素18  RT-PCR
文章编号:0366-6964(2005)09-0873-04
收稿时间:2004-08-24
修稿时间:2004-08-24

cDNA Cloning and Expression of Mature Bovine Interleukin-18 Gene
LIU Wen-qiang,HU Jing-dong,YANG Shao-hua,ZHAO Hong-kun,GAO Yun-dong,ZHONG Ji-feng.cDNA Cloning and Expression of Mature Bovine Interleukin-18 Gene[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2005,36(9):873-876.
Authors:LIU Wen-qiang  HU Jing-dong  YANG Shao-hua  ZHAO Hong-kun  GAO Yun-dong  ZHONG Ji-feng
Abstract:
Keywords:cattle  interleukin- 18  RT-PCR
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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