| 重组杆状病毒表达Sf-caspase-1双链RNA对昆虫细胞凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 欧艳梅,许晓东. 重组杆状病毒表达Sf-caspase-1双链RNA对昆虫细胞凋亡的影响[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2016, 44(11): 187-192 |
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| 作者姓名： | 欧艳梅 许晓东 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 生命科学学院,西北农林科技大学 生命科学学院 |
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| 基金项目： | 陕西省自然科学基金项目（2011JM3002） |
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| 摘 要： | 【目的】构建包含Sf-caspase-1反向重复序列的重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp,并在草地贪夜蛾(Sf9)细胞中表达Sf-caspase-1双链RNA,用以抑制Sf9细胞的凋亡,为未来优化杆状病毒表达系统提供试验依据。【方法】将Sf-caspase-1反向重复序列构建到pBac5上,与AcMNPV Bacmid共转染Sf9细胞产生重组杆状病毒,用RT-PCR和PI活细胞染色方法,分别检测Sf-caspase-1mRNA含量及Sf9细胞的凋亡情况。【结果】PCR和双酶切检测结果表明,成功构建了重组质粒pBac5-dsCasp,并得到重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp。PI染色结果表明,相比野生型病毒vAcMNPV,重组杆状病毒vAcMNPV-dsCasp能够抑制Sf9细胞的凋亡。RT-PCR结果表明,vAcMNPV-dsCasp感染的Sf9细胞中Sf-caspase-1mRNA含量明显下降。【结论】在重组杆状病毒上表达Sf-caspase-1双链RNA确实能够沉默Sf-caspase-1,从而抑制细胞凋亡。
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| 关 键 词： | vAcMNPV；RNAi；dsRNA；Sf-caspase-1；细胞凋亡；杆状病毒表达系统 |
| 收稿时间： | 2015-05-29 |
Influence of insect cell apoptosis by expression of Sf-caspase-1 double stranded RNA in recombinant baculovirus |
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| OU Yanmei and XU Xiaodong. Influence of insect cell apoptosis by expression of Sf-caspase-1 double stranded RNA in recombinant baculovirus[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2016, 44(11): 187-192 |
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| Authors: | OU Yanmei and XU Xiaodong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | vAcMNPV RNAi dsRNA Sf-caspase-1 cell apoptosis baculovirus expression system |
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