| 神经毒素基因RjAa17f在Sf9细胞中的表达及活性分析 |
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| 引用本文： | 孟 姣,于 欢,周 斌,等. 神经毒素基因RjAa17f在Sf9细胞中的表达及活性分析[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2016, 44(11): 166-171 |
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| 作者姓名： | 孟 姣 于 欢 周 斌 等 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 植保资源利用与病虫害治理教育部重点实验室,西北农林科技大学 植保资源利用与病虫害治理教育部重点实验室,西北农林科技大学 植保资源利用与病虫害治理教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31170609，31270691） |
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| 摘 要： | 【目的】在昆虫草地贪夜蛾细胞(Sf9)中表达一种能专一阻断昆虫钠、钾离子通道的神经毒素基因RjAa17f。【方法】运用杆状病毒真核表达系统表达RjAa17f毒蛋白,并用蛋白质印迹对其进行检测;测定RjAa17f毒蛋白引起健康棉铃虫中肠膜电位的变化,并对其毒力进行测定。【结果】通过重组杆状病毒质粒的转染和Western blot检测验证,神经毒素基因RjAa17f的重组Bacmid已经成功转染到Sf9细胞中,且在Sf9中表达出与预测大小一致的RjAa17f目的蛋白;此毒蛋白作用于棉铃虫中肠3~12h后,中肠膜电位与CK相比差异显著,且随着作用时间的延长,棉铃虫中肠膜电位呈逐步升高的趋势,作用9h以后,升高的幅度逐渐降低,趋于平缓。RjAa17f毒蛋白对棉铃虫的LD50为108.12μg/g。【结论】在Sf9细胞内表达出了有活性的RjAa17f毒蛋白,且该毒蛋白对棉铃虫中肠膜电位有显著改变。
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| 关 键 词： | 棉铃虫；神经毒素基因RjAa17f；Sf9；RjAa17f毒蛋白；杆状病毒真核表达系统 |
| 收稿时间： | 2015-05-15 |
Expression and activity of neurotoxin gene RjAa17f in Sf9 cells |
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| MENG Jiao,YU Huan and ZHOU Bin,et al. Expression and activity of neurotoxin gene RjAa17f in Sf9 cells[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2016, 44(11): 166-171 |
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| Authors: | MENG Jiao YU Huan ZHOU Bin et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicoverpa armigera neurotoxin gene RjAa17f Sf9 toxic protein RjAa17f baculovirus eukaryotic expression system |
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