摘 要: | 目的:在世界范围内,R质粒在细菌间的传递,引起了多重耐药性菌株的增加,给临床上抗生素的使用造成了严重的困难。人们试图寻找有效的消除剂,把R质粒从宿主菌株中消除掉,使其重新恢复对抗生素的敏感性。中药黄连常用于治疗腹泻与细菌性痢疾。但对致婴幼儿腹泻的大肠杆菌的R质粒是否有消除作用?本课题以黄连为质粒消除剂,研究黄连对大肠杆菌R质粒的消除作用。方法:致婴儿腹泻的大肠杆菌为本室保存菌株,已知对四环素、链霉素、氨苄青霉素耐药,其耐药性均由质粒介导。黄连为多次蒸馏提取的水溶性粉剂,主要成分为小檗碱。由吉林省中医中药研究院药物研究室提供。首先将大肠杆菌接种LB培养基中,经活化后,分别加入含不同浓度黄连的培养基中,判定黄连的亚抑菌浓度。从亚抑菌浓度管中取50ul菌液,分别划种于SS平板上,经培养后,挑取单个菌落,以影印培养法,依次转接于含TC(20ug/ml),SM(40ug/ml)或AP(20ug/ml)的药物平板上,37℃培养24~48h。消除子的筛选和鉴定:选择在含抗素的选择平板上不生长,而在不含抗生素的普通平板上生长的菌落,即为R质粒消除子。再经快速质粒抽提,琼脂糖凝胶电泳,以检测质粒带的消失情况。结果:黄连(1.
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