| 番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备 |
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| 引用本文： | 郑宽瑜,董家红,尹跃艳,方琦,苏晓霞,张仲凯.番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备[J].西南农业学报,2015(1):168-171. |
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| 作者姓名： | 郑宽瑜 董家红 尹跃艳 方琦 苏晓霞 张仲凯 |
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| 作者单位： | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室;云南省农业科学院高山经济植物研究所 |
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| 基金项目： | 973计划前期研究专项(2010CB134501);国家自然科学基金(31060237) |
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| 摘 要： | 用RT-PCR从感染番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)的番茄中扩增出编码病毒非结构蛋白NSs基因,将NSs基因构建到原核表达载体p ET-30 a中,获得原核表达载体p ET-30a-NSs,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDSPAGE电泳分析显示,高效诱导表达了57k Da融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/8192。用制备好的抗血清对TZSV感病病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清可用于TZSV的检测,并为进一步研究NSs功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 番茄环纹斑点病毒 非结构蛋白 原核表达 抗血清 检测 |
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