| 核黄素合酶基因RNAi表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 任秀艳,乔洁,张江丽. 核黄素合酶基因RNAi表达载体的构建[J]. 西南农业学报, 2012, 25(3): 997-1000 |
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| 作者姓名： | 任秀艳 乔洁 张江丽 |
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| 作者单位： | 廊坊师范学院生命科学学院,河北廊坊,065000 |
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| 基金项目： | 廊坊师范学院科学研究资助项目 |
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| 摘 要： | 根据拟南芥RS基因的编码序列设计引物,利用PCR技术从pGADT7-RS重组质粒上扩增到RS基因编码区476 bp片段。利用双链RNA介导的基因沉默技术,构建RS基因沉默表达载体,为进一步研究该基因在植物与蛋白激发子HpaGXoo互作中的功能及其作用机制奠定基础。首先将RS基因片段连接到pUCm-T载体上,用Pst I/BamH I和Pst I/Xho I分别对pUCm-RS重组载体进行酶切,得到2个RS基因片段;先后将其连接到用相应限制酶酶切的pBSSK-in载体上,构建成pBSSK-RS-in-RS重组载体,该重组载体中的2个RS片段大小一致,反向重复;最后用Sac I/Kpn I酶切pBSSK-RS-in-RS载体得到RS-intron-RS片段,连入表达载体pCAMBIA1301中,构建成该基因的沉默表达载体。
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| 关 键 词： | RS基因 基因沉默 载体构建 |
Construction of RNAi Expression Vectors Containing RS Gene |
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| REN Xiu-yan , QIAO Jie , ZHANG Jiang-li. Construction of RNAi Expression Vectors Containing RS Gene[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences, 2012, 25(3): 997-1000 |
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| Authors: | REN Xiu-yan QIAO Jie ZHANG Jiang-li |
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| Affiliation: | (College of Life Science,Langfang Teacher College,Hebei Langfang 065000,China) |
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