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抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立
引用本文:李志中,秦立廷,王喜军,陈伟业,范蕾,李培锋,步志高.抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立[J].中国预防兽医学报,2007,29(11):891-895.
作者姓名:李志中  秦立廷  王喜军  陈伟业  范蕾  李培锋  步志高
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;内蒙古农业大学,动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 内蒙古农业大学,动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018
摘    要:将原核表达重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)以100μg/只剂量免疫8周龄BALB/c小鼠,4次免疫后进行细胞融合,以昆虫细胞表达重组鸡γ-干扰素为检测抗原,筛选出阳性克隆株,经有限稀释,获得1株稳定分泌抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分泌抗体亚型为IgG1型,轻链为Κ链,命名为G1株。Western blot检测显示,该单克隆抗体与原核表达和昆虫细胞表达的rChIFN-γ均具有良好的免疫反应原性。昆虫细胞表达rChIFN-γ经该G1单克隆抗体作用后,失去抑制水疱性口炎病毒(VSV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)复制的能力。利用纯化的单克隆抗体和昆虫细胞表达rChIFN-γ建立相对定量ELISA检测方法,取吸光度值(Y)对昆虫细胞表达rChIFN-γ的抗病毒活性单位对数(X)作回归曲线,回归方程为Y=0.1164~*X-0.1281,回归系数R=0.9539,具有艮好的线性关系。

关 键 词:鸡γ-干扰素  单克隆抗体
文章编号:1008-0589(2007)11-0891-05
修稿时间:2007-03-16

Generating a monoclonal antibody against chicken interferon gamma for the establishment of quantitative ELISA
LI Zhi-zhong,QIN Li-ting,WANG Xi-jun,CHEN Wei-ye,FAN Lei,LI Pei-feng,BU Zhi-gao.Generating a monoclonal antibody against chicken interferon gamma for the establishment of quantitative ELISA[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2007,29(11):891-895.
Authors:LI Zhi-zhong  QIN Li-ting  WANG Xi-jun  CHEN Wei-ye  FAN Lei  LI Pei-feng  BU Zhi-gao
Institution:1. National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences Harbin 150001, China; 2. College of Animal Science and Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Huhhot 010018, China
Abstract:
Keywords:chicken interferon gamma  monoclonal antibody
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