| 基于ITS与factor1-alpha序列桉树焦枯病菌的双重PCR快速检测 |
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| 引用本文： | 张静,麻文建,朱天辉.基于ITS与factor1-alpha序列桉树焦枯病菌的双重PCR快速检测[J].植物保护,2015,41(5):110-115. |
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| 作者姓名： | 张静 麻文建 朱天辉 |
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| 作者单位： | 四川农业大学林学院，雅安 625014 |
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| 摘 要： | 桉树焦枯病是威胁桉树生长的首要病害,建立准确、有效的桉树焦枯病的PCR快速检测技术是桉树焦枯病前期诊断的必要手段。试验以桉树焦枯病原菌(Calonectria morganii)DNA为模板,分别以ITS和factor 1-alpha序列为靶区域,针对Calonectria属和C.morganii设计了CYS1/CYS2和EF-S-1/EF-A-1两对特异性引物,建立了基于属和种的双重PCR快速检测技术。利用引物CYS1/CYS2可以从全部Calonectria属的供试菌株中扩增出一条351bp大小的条带,单独用特异性引物EF-S-1/EF-A-1进行PCR扩增,仅病原菌扩增出197bp的条带,同时使用2对引物时,病原菌可扩增出两条明亮条带。当体系退火温度为53℃时,DNA灵敏度检测限度达到450fg/μL。野外田间时效检测结果显示,该体系能准确检测出不同发病程度桉树组织上的病原菌,完全符合田间检测的要求。这是关于桉树焦枯病快速检测的首次报道。
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| 关 键 词： | 桉树焦枯病，桉树焦枯病原菌，快速检测，PCR扩增 |
| 收稿时间： | 2014/6/21 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/12/17 0:00:00 |
Duplex PCR technique based on the sequences of ITS and factor 1-alpha gene for the rapid detection of Calonectria morganii |
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| Zhang Jing,Ma Wenjian,Zhu Tianhui.Duplex PCR technique based on the sequences of ITS and factor 1-alpha gene for the rapid detection of Calonectria morganii[J].Plant Protection,2015,41(5):110-115. |
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| Authors: | Zhang Jing Ma Wenjian Zhu Tianhui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | eucalyptus dieback Calonectria morganii rapid detection PCR amplification |
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