| 中华绒螯蟹ELOVL6 cDNA全长克隆及其表达分析 |
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| 引用本文： | 施秋燕,杨志刚,姚琴琴,成永旭,杨青,魏帮鸿.中华绒螯蟹ELOVL6 cDNA全长克隆及其表达分析[J].水产学报,2016,40(6):844-855. |
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| 作者姓名： | 施秋燕 杨志刚 姚琴琴 成永旭 杨青 魏帮鸿 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海,201306 |
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| 基金项目： | 其它;国家自然科学基金;国家高技术研究发展计划 |
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| 摘 要： | 为了探究中华绒螯蟹自身脂肪酸合成能力,采用RACE技术,克隆获得中华绒螯蟹ELOVL6 c DNA序列全长(Gen Bank accession:KT779219)。该序列全长2247 bp,包括235、873和1139 bp的5'非编码区(5'-UTR)、开放阅读框(ORF)和3'非编码区(3'-UTR),编码290个氨基酸(AA),具有ELOVL家族的全部特征:6个跨膜区、高度保守的组氨酸簇HXXHH、多个保守区以及内质网滞留信号KXKXX。分析发育树表明,ELOVL2与ELOVL5聚为一支,ELOVL6聚为另一支,其中中华绒螯蟹ELOVL6与其他节肢动物ELOVL6聚为一支,与凡纳滨对虾聚为一小支。采用异源表达方法研究ELOVL6编码的蛋白质对脂肪酸的作用,GC-MS结果显示,转基因的酵母培养物C16:0和C16:1n-7含量下降,而C18:0和C18:1n-9的含量升高,同时有新产物C18:1n-7产生。通过荧光定量PCR(q PCR)技术研究ELOVL6基因在中华绒螯蟹不同组织及不同脂肪源喂养下的表达情况,显示该基因在肠道、胃、心脏、肝胰腺、胸神经节、肌肉、眼柄、鳃和脑神经节9个组织均有表达,其中在肝胰腺中表达量最高,显著高于其他组织;在不同脂肪源饲喂的结果中,肝胰腺、肌肉、卵巢和精巢4个组织中均有表达,并且各组织在全鱼油组饲喂下表达量最低,其中用全豆油组饲喂后,肝胰腺中的表达情况显著升高,明显高于全鱼油组和鱼油豆油混合组。以上结果综合表明,中华绒螯蟹中ELOVL6能够催化C16的饱和及C16的单不饱和脂肪酸延长,同时受到饲料中不同脂肪源的一定影响,这为探究中华绒螯蟹PUFA合成途径及脂肪酸调控机制提供了依据。
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| 关 键 词： | 中华绒螯蟹 长链脂肪酸延长酶6 基因克隆 异源表达 组织表达 |
| 收稿时间： | 2015/12/8 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2/5/2016 12:00:00 AM |
Full-length cDNA cloning of ELOVL6 and its tentative study in Chinese mitten crab(Eriocheir sinensis) |
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| SHI Qiuyan,YANG Zhigang,YAO Qinqin,CHENG Yongxu,YANG Qing and WEI Banghong.Full-length cDNA cloning of ELOVL6 and its tentative study in Chinese mitten crab(Eriocheir sinensis)[J].Journal of Fisheries of China,2016,40(6):844-855. |
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| Authors: | SHI Qiuyan YANG Zhigang YAO Qinqin CHENG Yongxu YANG Qing and WEI Banghong |
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| Institution: | Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China,Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China,Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China,Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China,Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China and Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | EriocheirSsinensis ELOVL6 gene cloning heterologous expression tissue expression |
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