| SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法检测禽流感病毒 |
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| 引用本文： | 刘丽玲,姜永萍,王秀荣,陈化兰,魏萍.SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法检测禽流感病毒[J].畜牧兽医学报,2006,37(11):1189-1193. |
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| 作者姓名： | 刘丽玲 姜永萍 王秀荣 陈化兰 魏萍 |
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| 作者单位： | [1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001 [2]东北农业大学,哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助（30200201;30440009） |
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| 摘 要： | 为建立检测禽流感病毒（AIV）的SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR方法，根据AIV的M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞，收集感染6、12、24、48、72h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基因进行检测，试图建立快速检测AIV的SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法，并与普通RT—PCR方法和传统的病毒滴定方法进行比较。结果表明：此次建立的检测AIV的SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR方法能检测到感染MDCK细胞后72h的AIV，对169份泄殖腔拭子和咽喉拭子中的AIV检出率为5．33％（9／169），而普通RT—PCR方法检出率为6．51％（11／169），病毒滴定检出率为5．62（9／160）。对其他病毒（NDV、IBDV、IBV、VA）则未检测到，且整个检测过程只需4h，表明该方法特异、准确、快速。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 SYBR Green Ⅰ RT—PCR RT—PCR 病毒滴定 检测 |
| 文章编号： | 0366-6964（2006）11-1189-05 |
| 收稿时间： | 2006-01-04 |
| 修稿时间： | 2006-01-04 |
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