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脱氧核酶对端粒酶hTERT mRNA的切割以及对鼻咽癌细胞凋亡相关基因的影响
引用本文:赵家明,李明意,李震,杨展,张毅. 脱氧核酶对端粒酶hTERT mRNA的切割以及对鼻咽癌细胞凋亡相关基因的影响[J]. 湛江医学院学报, 2005, 23(3): 242-245
作者姓名:赵家明  李明意  李震  杨展  张毅
作者单位:广东医学院附属医院,中心实验室,广东,湛江,524001;广东医学院附属医院,肝胆外科,广东,湛江,524001
摘    要:目的:探讨脱氧核酶对端粒酶蛋白亚基hTERTmRNA的切割作用及对人鼻咽癌细胞凋亡相关基因表达的影响。方法:针对hTERT基因的核苷酸序列,合成“10~23”型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割hTERTmRNA;转染鼻咽癌细胞后,用RT-PCR扩增hTERT基因片段,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性,用RT-PCR和荧光免疫测定凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果:未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3'末段添加倒位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割hTERTmRNA;在转染鼻咽癌细胞后,DzTi比DzT对hTERTmRNA表现出更强的切割作用,DzTi能够显著地降低鼻咽癌细胞端粒酶活性(P<0.01)、抑制鼻咽癌细胞的生长(P<0.05)和bcl-2基因的表达(P<0.05),上调bax基因的表达(P<0.05)。DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT'和DzTi'在体外和胞内均不表现对hTERTmRNA的切割作用。结论:人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割端粒酶hTERTmRNA,并降低鼻咽癌细胞的端粒酶活性,促进鼻咽癌细胞凋亡。作为一种新发现的催化性核酸,脱氧核酶在肿瘤的基因治疗领域中将具有极其重要的应用价值。

关 键 词:脱氧核酶  端粒酶  鼻咽肿瘤  细胞凋亡
文章编号:1005-4057(2005)03-0242-04
修稿时间:2005-01-26

Synthesized DNAzymes cleaves the mRNA of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) and impacts on expressions of apoptosis related genes in nasopharyngeal carcinoma cells
ZHAO Jia-ming,LI Ming-yi,LI Zhen,YANG Zhan,ZHANG Yi. Synthesized DNAzymes cleaves the mRNA of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) and impacts on expressions of apoptosis related genes in nasopharyngeal carcinoma cells[J]. Journal of Guangdong Medical College, 2005, 23(3): 242-245
Authors:ZHAO Jia-ming  LI Ming-yi  LI Zhen  YANG Zhan  ZHANG Yi
Affiliation:ZHAO Jia-ming1,LI Ming-yi2,LI Zhen1,YANG Zhan1,ZHANG Yi1
Abstract:
Keywords:DNAzyme  telomerase  nasopharyngeal carcinoma  apoptosis
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