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柽柳GRAS转录因子基因启动子克隆和表达分析
引用本文:李雪燕,金胶胶,赵玉琳,李冠霖,王培龙,高彩球. 柽柳GRAS转录因子基因启动子克隆和表达分析[J]. 中国农学通报, 2016, 32(2): 28-32. DOI: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb15080006
作者姓名:李雪燕  金胶胶  赵玉琳  李冠霖  王培龙  高彩球
作者单位:东北林业大学,东北林业大学,东北林业大学,东北林业大学,东北林业大学,东北林业大学国家级林木遗传育种实验室
基金项目:国家自然科学基金“柽柳Dof转录因子的耐盐调控机理研究”(31370676);大学生创新实验训练项目国家级(201410225068)。
摘    要:克隆获得柽柳GRAS 转录因子基因启动子序列,并对其表达模式进行分析,从而初步探究GRAS转录因子基因的表达特征和功能。CTAB法提取刚毛柽柳基因组DNA,按照Genome Walking Kit 说明克隆GRAS 转录因子基因启动子序列,将克隆获得的GRAS 转录因子基因启动子序列定向替换pCAMB1301 载体上的35S启动子序列,构建融合表达载体,以驱动GUS 基因表达,瞬时侵染拟南芥后进行GUS 基因的染色。成功克隆获得刚毛柽柳936 bp 的GRAS 转录因子基因启动子序列。PLACE 和PlantCARE 数据库分析结果表明该启动子不仅包含启动子区的核心元件CAAT-box 和TATA-box,还含有多个与逆境应答有关的顺式调控元件。成功将GRAS 基因启动子序列定向置换pCAMBIA1301 的35S启动子,构建重组载体PGRAS::GUS。瞬时转化拟南芥后GUS 染色,结果显示转基因拟南芥叶片被染色而根部着色较浅。初步表明克隆获得的GRAS 基因启动子具有启动子表达活性,其可能参与了柽柳的抗逆应答,为进一步分析该基因的抗逆功能和抗逆机制奠定了基础。

关 键 词:经营模式  经营模式  土壤养分  山核桃  
收稿时间:2015-08-02
修稿时间:2015-09-14

Cloning and Expression Analysis of Promoter of GRAS Transcription Factor from Tamarix hispida
Abstract:
Keywords:
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