| 分枝杆菌Hsp70对PCV2 Cap蛋白的免疫佐剂作用研究 |
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| 引用本文： | 王亚杰,吴双,吴植,朱善元,孙怀昌.分枝杆菌Hsp70对PCV2 Cap蛋白的免疫佐剂作用研究[J].畜牧与兽医,2019(9):69-75. |
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| 作者姓名： | 王亚杰 吴双 吴植 朱善元 孙怀昌 |
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| 作者单位： | 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室/江苏农牧科技职业学院;扬州大学兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心 |
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| 摘 要： | 为了研究分枝杆菌热休克蛋白(Hsp70)对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白的免疫佐剂作用,以自聚肽ELK16为纯化标签,分别与Hsp70和PCV2 Cap基因融合后诱导表达,利用离心洗涤法进行融合蛋白纯化,获得了纯化的融合蛋白ELK16-Cap、ELK16-Hsp70和ELK16-Cap-Hsp70,其纯度高达95%、96%和85%,产量分别为92、84和83 mg/L;接着用PBS、ELK16-Cap、ELK16-Cap+弗氏不完全佐剂(IFA)、ELK16-Cap+ELK16-Hsp70和ELK16-Cap-Hsp70分别免疫小鼠,初免后21 d ELK16-Cap-Hsp70免疫组抗体水平达到最高;在二免后2周取免疫小鼠脾脏淋巴细胞,用试剂盒检测细胞因子表达,TNF-α浓度依次为588.55、802.55、995.55、1 382.55和1 719.55 pg/mL,IFN-γ浓度依次为46.30、92.22、155.56、470.37和518.15 pg/mL,IL-12浓度依次为14.72、28.06、20.83、31.39和34.72 pg/mL。这些研究结果表明,Hsp70对刺激PCV2 Cap蛋白ELISA抗体产生的作用优于IFA,但两者融合蛋白的刺激作用较强;与Cap蛋白融合的Hsp70对刺激TNF-α、IFN-γ和IL-12产生的作用较强,而ELK16-Hsp70+ELK16-Cap对3种细胞因子产生的刺激作用次之。
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| 关 键 词： | 分枝杆菌Hsp70 PCV2 Cap蛋白 融合表达 小鼠免疫 细胞因子 |
Immune adjuvant effect of Mycobacterium tuberculosis Hsp70 on the PCV2 Cap protein |
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