| 猪源CD163受体蛋白多克隆抗体的制备及其PRRSV阻断效力研究 |
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| 引用本文： | 马晓莉,舒会友,夏兆伦,余文兰,刘永伦,徐铮.猪源CD163受体蛋白多克隆抗体的制备及其PRRSV阻断效力研究[J].畜牧与兽医,2019(10):76-80. |
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| 作者姓名： | 马晓莉 舒会友 夏兆伦 余文兰 刘永伦 徐铮 |
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| 作者单位： | 华南农业大学实验动物中心/国家生猪种业工程技术研究中心/动物科学学院;广州广力莱生物科技有限公司 |
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| 摘 要： | 为了制备猪源CD163受体蛋白鼠源多克隆抗体并检验其病毒阻断效力,采用RT-PCR方法扩增了猪肺泡巨噬细胞(PAM)CD163受体SRCR4-6功能区域片段,将其克隆至载体pET-32a中,并在大肠杆菌中表达重组CD163受体蛋白,纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂充分混合乳化;采用皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后获得多克隆抗体,应用间接ELISA方法检测抗体含量,以病毒阻断试验和间接免疫荧光法验证其病毒阻断效力。结果显示:重组蛋白主要以包涵体的形式表达,相对分子量约为50 kDa,制备的CD163受体蛋白多克隆抗体含量较高,经2～8倍稀释后,抗体阻断PRRSV感染细胞的能力逐渐下降。研究表明,在大肠杆菌中成功表达了PRRSV重组CD163受体蛋白,制备的鼠源多克隆抗体具有较明显的阻断PRRSV感染细胞的效力。本研究为深入研究病毒的入侵机制和PRRSV的防控提供了试验基础和新的思路。
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| 关 键 词： | CD163受体蛋白 原核表达 弗氏佐剂 多克隆抗体 病毒阻断效力 |
Preparation of polyclonal antibody against CD163 and its effect on blocking PRRSV infection |
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