| 猪流感病毒H1N1亚型HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 朱和超,范桂芳,朱莉莉,彭忠,华琳,吴斌. 猪流感病毒H1N1亚型HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 畜牧与兽医, 2019, 0(6): 81-85 |
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| 作者姓名： | 朱和超 范桂芳 朱莉莉 彭忠 华琳 吴斌 |
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| 作者单位： | 生猪健康养殖协同创新中心/华中农业大学动物医学院 |
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| 摘 要： | 为获得H1N1亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)蛋白的单克隆抗体(McAb),选取A/swine/NanChang/H1N1/2009毒株,病毒经增殖、超速离心后,收集病毒粒子作为免疫原,将SIV粒子包被建立了间接ELISA方法。将免疫4次的BALB/c小鼠,经间接ELISA测定小鼠血清效价,将效价高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(sp2/0)进行融合。采用间接ELISA的方法筛选效价高的阳性细胞孔,采用有限稀释法进行3轮亚克隆,得到了5株杂交瘤细胞株,分别命名为2C6、5G5、1D5、3G3、4F11。随后对5株杂交瘤细胞的亚型进行鉴定,显示2C6、1D5、4F11为IgM亚型,5G5、3G3为IgG1亚型,5株杂交瘤的L链均为k链。间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测表明,5G5能够与HA蛋白发生特异性的结合。本研究为进一步建立H1亚型SIV的相关检测方法及对HA蛋白的功能研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 猪流感病毒 流感病毒血凝素蛋白 杂交瘤细胞 单克隆抗体 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against swine influenza virus H1N1 subtype HA protein |
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