| 牛腺病毒5型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 安微,陈世界,王史,张婧,杨苗,薛昌华,余姓鸿,林华.牛腺病毒5型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].畜牧与兽医,2019(8):101-104. |
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| 作者姓名： | 安微 陈世界 王史 张婧 杨苗 薛昌华 余姓鸿 林华 |
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| 作者单位： | 四川出入境检验检疫局检验检疫技术中心;海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
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| 摘 要： | 建立针对牛腺病毒5型六邻体(Hexon)基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法。根据牛腺病毒5型Hexon基因高度保守区设计引物和TaqMan探针,绘制标准曲线,对其灵敏度、特异性、重复性进行验证,建立牛腺病毒5型实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法。结果显示,构建的重组质粒pUC57-BAV5,标准曲线在10~2～10~7拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.975 2,建立检测方法的最低检测限为32拷贝/μL;应用建立的方法检测牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、牛呼吸道合胞体病毒无交叉反应;重复性试验表明,同一浓度的20个平行样品的变异系数为1.4%。牛腺病毒5型TaqMan探针荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可以用于牛腺病毒5型的快速、准确的检测。
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| 关 键 词： | 牛腺病毒5型 Hexon基因 TaqMan探针 荧光定量PCR |
Detection of bovine adenovirus type 5 using TaqMan real time quantitative PCR |
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