| 抗chTLR3单克隆抗体制备及其初步应用 |
| |
| 引用本文： | 唐泽群,罗海燕,葛铭,郭荣,许丹蕾,张瑞莉.抗chTLR3单克隆抗体制备及其初步应用[J].畜牧兽医学报,2019(6):1292-1300. |
| |
| 作者姓名： | 唐泽群 罗海燕 葛铭 郭荣 许丹蕾 张瑞莉 |
| |
| 作者单位： | 东北农业大学动物医学学院;黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(31272533) |
| |
| 摘 要： | Toll样受体3(TLR3)是激发机体天然免疫的模式识别受体,为了制备能与天然结构的鸡TLR3(chTLR3)蛋白结合的单克隆抗体,将前期构建的可以在细胞内表达的真核重组质粒pVAX1-Igk-chTLR3免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗chTLR3单克隆抗体;并应用该抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术检测镉中毒雏鸡外周血淋巴细胞与脾内chTLR3的表达变化。结果发现,获得1株阳性杂交瘤细胞,该细胞株单个细胞染色体数量为(94±2)条,细胞上清效价为1∶25,抗体亚类鉴定为IgG3,细胞上清能够与原核表达的chTLR3胞外区蛋白及鸡外周血淋巴细胞中的chTLR3特异性结合。应用此抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术均能够在对照组和染镉组雏鸡外周血淋巴细胞及脾内检测到chTLR3的蛋白表达。结果表明,成功制备了具有天然活性的chTLR3单克隆抗体,该抗体可用于Western blot、间接免疫荧光技术及流式细胞术研究chTLR3在鸡组织细胞的分布定位、表达变化,为示踪chTLR3蛋白分布、表达及研究其在鸡发病机制中的作用提供了重要的物质基础。
|
| 关 键 词： | chTLR3 单克隆抗体 WESTERN BLOT 间接免疫荧光 流式细胞术 |
Preparation of Monoclonal Antibody against chTLR3 and Its Preliminary Application |
| |
| TANG Zequn,LUO Haiyan,GE Ming,GUO Rong,XU Danlei,ZHANG Ruili.Preparation of Monoclonal Antibody against chTLR3 and Its Preliminary Application[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2019(6):1292-1300. |
| |
| Authors: | TANG Zequn LUO Haiyan GE Ming GUO Rong XU Danlei ZHANG Ruili |
| |
| Institution: | (College of Veterinary Medicine,Northeast Agriculture University,Harbin 150030,China;Heilongjiang Key Laboratory for Laboratory Animals and Comparative Medicine,Harbin 150030,China) |
| |
| Abstract: | TANG Zequn;LUO Haiyan;GE Ming;GUO Rong;XU Danlei;ZHANG Ruili(College of Veterinary Medicine,Northeast Agriculture University,Harbin 150030,China;Heilongjiang Key Laboratory for Laboratory Animals and Comparative Medicine,Harbin 150030,China) |
| |
| Keywords: | chTLR3 monoclonal antibody Western blot flow cytometry indirect immunofluorescence |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
|
