| 草莓果实FaRIPK1蛋白的酵母外源表达及验证 |
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| 引用本文： | 徐诚,沈元月. 草莓果实FaRIPK1蛋白的酵母外源表达及验证[J]. 北京农学院学报, 2016, 31(2): 42-45. DOI: 10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2016.0209 |
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| 作者姓名： | 徐诚 沈元月 |
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| 作者单位： | 农业应用新技术北京市重点实验室/北京农学院植物科学技术学院,北京,102206;农业应用新技术北京市重点实验室/北京农学院植物科学技术学院,北京,102206 |
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| 基金项目： | 北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划项目(IDHT20140509)，科技北京百名领军人才培养计划 |
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| 摘 要： | [目的]类受体蛋白激酶在植物的生长发育及果实成熟过程中发挥重要作用,而植物中已鉴定的类受体激酶绝大多数属于LRR型.为了得到草莓中LRR型蛋白激酶FaRIPK1,从而进一步研究其功能.本实验采用真核表达的方法诱导表达FaRIPK1蛋白质,以期确定其最佳的诱导表达时间.[方法]以‘童子一号’草莓果实为试验材料,扩增出FaRIPK1基因的功能区序列,构建真核表达载体pPICZB-RIPK1后转入酵母表达菌株X-33诱导表达,通过在0,12,24,36 h处取样检测FaRIPK1蛋白质的表达情况并采用Ni-NTA琼脂糖树脂亲和层析柱纯化得到目的蛋白,纯化后的FaRIPK1蛋白质再进行Western-blot验证.[结果]重组表达菌株经过BMMY诱导培养基诱导24 h后FaRIPK1蛋白质的表达量达到最高值,此时最利于FaRIPK1蛋白质的纯化.Western-blot验证表明所得蛋白质确为FaRIPK1蛋白质.[结论]确定了诱导表达后24 h为FaRIPK1蛋白质真核表达的最佳时间,为进一步研究FaRIPK1蛋白质的功能奠定基础.
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| 关 键 词： | LRR型蛋白 草莓果实 毕赤酵母 蛋白表达 |
Yeast expression and identification of strawberry FaRIPK1 protein |
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| XU Cheng,SHEN Yuanyue. Yeast expression and identification of strawberry FaRIPK1 protein[J]. Journal of Beijing Agricultural College, 2016, 31(2): 42-45. DOI: 10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2016.0209 |
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| Authors: | XU Cheng SHEN Yuanyue |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | LRR type protein kinase strawberry fruit pichia yeast protein |
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