| 禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 贠炳岭,李德龙,胡晓亮,刘在斯,秦立廷,吴关,刘文,祁小乐,王永强,高宏雷,高玉龙,王笑梅.禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国预防兽医学报,2012(10):782-785. |
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| 作者姓名： | 贠炳岭 李德龙 胡晓亮 刘在斯 秦立廷 吴关 刘文 祁小乐 王永强 高宏雷 高玉龙 王笑梅 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室;黑龙江出入境检验检疫局 |
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| 基金项目： | 现代农业肉鸡产业技术体系建设(nycytx-42-G3-01);公益性行业(农业)科研专项经费(201203056);哈尔滨市科技攻关计划项目(2010AA6AN034) |
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| 摘 要： | 为制备禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原的单克隆抗体(MAb),本研究从ALV-J病毒株感染DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出ALV群特异性抗原p27基因,并将其克隆至pMD18-T载体中,酶切鉴定后进行序列测定和分析。最后将p27基因亚克隆至载体pET-30a(+)中,转化受体菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测获得融合蛋白。经过western blot检测,表达的蛋白具有良好的反应原性。将纯化的p27蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得5株能稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株。5株MAb与纯化的p27蛋白以及不同亚群ALV可以发生特异性反应。所制备的MAb为禽白血病的诊断方法研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 禽白血病病毒 p27蛋白 原核表达 单克隆抗体 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against the group specific antigen of avian leukosis virus |
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| YUN Bing-ling,LI De-long,HU Xiao-liang,LIU Zai-si,QIN Li-ting,WU Guan,LIU Wen,QI Xiao-le,WANG Yong-qiang,GAO Hong-lei,GAO Yu-long,WANG Xiao-mei.Preparation and identification of monoclonal antibodies against the group specific antigen of avian leukosis virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2012(10):782-785. |
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| Authors: | YUN Bing-ling LI De-long HU Xiao-liang LIU Zai-si QIN Li-ting WU Guan LIU Wen QI Xiao-le WANG Yong-qiang GAO Hong-lei GAO Yu-long WANG Xiao-mei |
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| Institution: | 1(1.Division of Avian Infectious Diseases,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China;2.Heilongjiang Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Harbin 150090,China) |
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| Abstract: | |
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