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不同DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响
引用本文:张敏,蔡俊鹏.不同DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响[J].安徽农业科学,2011,39(14):8231-8233.
作者姓名:张敏  蔡俊鹏
作者单位:华南理工大学生物科学与工程学院;华南理工大学轻工与食品学院;
基金项目:国家自然科学基金项目(40776091); 广东省海洋渔业科技推广专项项目(A200899H02); 广东省科技计划-省部产学研项目(2009B090300270)
摘    要:目的]研究不同DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响。方法]选用3种不同的DNA聚合酶对单一的7株菌进行PCR扩增,通过DGGE图谱分析探讨不同的DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响。结果]用相同的DNA聚合酶1时,上游引物使用357F1比357F2的效果要好。当357F1作为上游引物时,DNA聚合酶2明显好于DNA聚合酶1,但仍有干扰结果出现;当357F2作为上游引物时,使用DNA聚合酶1和DNA聚合酶2都不能使各菌株分离开来。使用高质量的DNA聚合酶3时,上游引物所加入的无论是40 bp还是只有18 bp的"GC"夹,都能够使不同的DNA片段分离开来。结论]不同的DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响是很大的,选择合适的DNA聚合酶是至关重要的。

关 键 词:PCR-DGG    DNA聚合酶  “GC”夹

Influences of Different DNA Polymerase for Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)
ZHANG Min et al.Influences of Different DNA Polymerase for Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2011,39(14):8231-8233.
Authors:ZHANG Min
Institution:ZHANG Min et al(College of Biosciences and Engineering,South China University of Technology,Guangzhou,Guangdong 510006)
Abstract:Objective] The research aimed to study the influences of different DNA polymerase for DGGE.Method] 7 strains were PCR amplified by using three different DNA polymerase,through the analysis of profiles to compare the influence of different DNA polymerase for DGGE.Result] When using the same DNA polymerase 1,the effects of forward primer 357F1 was better than 357F2.When the forward primer was 357F1,the effects of DNA polymerase 2 was better DNA polymerase 1,but still had interference.When the forward prime...
Keywords:Polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis  DNA polymerase  GC-clamp  
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