三华李SRAP反应体系的建立与优化

以三华李品系中的白脆鸡麻李1为供试材料，利用分步优化法对影响SRAP-PCR反应的5个因子进行优化，确立了三华李的SRAP-PCR反应体系：模板DNA 15 ng，Mg2+浓度3.0 mmol·L-1，引物浓度0.25 μmol·L-1，dNTPs 0.3 mmol·L-1，Taq DNA聚合酶1.0 U，10×Buffer 2.5 μL，反应总体积为25 μL，其余部分用ddH2O补充。利用优化的体系对18份李属种质资源进行扩增，经6%聚丙烯酰胺凝胶检测显示：条带清晰可靠、多态性好，可用于三华李的分子标记研究。

Construction and optimization of SRAP reaction system for Sanhua plum

The plum cultivar Baicui Jimali 1 selected from Sanhua plum， was used to optimize the factors of SRAP-PCR step by step. The results indicated that the optimal SRAP-PCR system for Sanhua plum in a 25 μL PCR reaction consisted of 15 ng DNA template， 3.0 mmol·L-1 Mg2+， 0.25 μmol·L-1 primer， 0.3 mmol·L-1 dNTP， 1.0 U Taq DNA polymerase， 2.5 μL 10×Buffer and ddH2O. Application of this optimum reaction system in eighteen accessions of plum by 6％denaturing polyacrylamide gel produced clear polymorphic patterns. It is demonstrated that the optimal SRAP-PCR system can be used for molecular research of Sanhua plum.