大蒜X病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立

采用逆转录环介导等温扩增技术（RT\|LAMP），建立一种便捷、灵敏的大蒜X病毒（Garlic virus X， GarVX）的快速检测方法。根据GarVX ORF4序列的保守区设计6条特异性引物，分别识别该保守区的8个位点，在反转录酶和Bst DNA聚合酶的作用下对靶序列进行扩增反应。通过条件优化，在65℃恒温条件下温浴60 min可成功检测GarVX。特异性检测结果表明，该方法可特异性检出GarVX，对大蒜A病毒（Garlic virus A， GarVA）、大蒜D病毒（Garlic virus D， GarVD）、大蒜E病毒（Garlic virus E， GarVE）等的检测均为阴性，且检测灵敏度高，最低检出限为5 pg·μL-1，是RT\|PCR方法的10倍。试验结果表明，RT\|LAMP检测方法可快速、特异、灵敏地检测GarVX，并适合现场快速检测。