| 鸡传染性支气管炎病毒Real-time RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 王鹏 高峰 王园 杨莹 路红 周双海 刘凤华. 鸡传染性支气管炎病毒Real-time RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 中国农学通报, 2013, 29(8): 45-49 |
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| 作者姓名： | 王鹏 高峰 王园 杨莹 路红 周双海 刘凤华 |
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| 作者单位： | 北京农学院动物科学技术学院,北京 |
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| 基金项目： | "十二五"农村领域国家科技计划课题"防治畜禽呼吸、消化系统常见病证中兽药创制及应用示范" |
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| 摘 要： | 为定量检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)载量,建立IBV的Real-time RT-PCR方法.用RT-PCR方法扩增出IBV的N基因片段,并克隆到pEASY-T3载体中,构建成含有N基因片段的重组质粒.应用该重组质粒进行SYBR Green I Real-time PCR,建立了定量检测IBV核酸的标准曲线与直线回归方程,该方法显示:特异性强,检测下限至少达到5.58× 102拷贝/μL,其重复性试验的变异系数小于3.2％；用建立的方法对实验接种IBV M41株的雏鸡组织中的病毒核酸进行了定量检测,检测结果显示:攻毒后肾脏中IBV含量高于支气管和肺脏,支气管和肺脏中病毒含量在攻毒后第3天高于攻毒后第7、10天,并证实临床表现与病毒载量之间存在密切关系.研究结果表明,建立的Real-time RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好,可用于IBV的定量检测.
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| 关 键 词： | 鸡传染性支气管炎病毒 Real-time RT-PCR 定量检测 |
| 收稿时间： | 2012-11-29 |
| 修稿时间： | 2012-12-25 |
Development and Application of Real-time RT-PCR Assay for Chicken Infectious Bronchitis Virus |
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| Wang Peng , Gao Feng , Wang Yuan , Yang Ying , Lu Hong , Zhou Shuanghai , Liu Fenghua. Development and Application of Real-time RT-PCR Assay for Chicken Infectious Bronchitis Virus[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2013, 29(8): 45-49 |
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| Authors: | Wang Peng Gao Feng Wang Yuan Yang Ying Lu Hong Zhou Shuanghai Liu Fenghua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | quantitative detection |
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