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枣树RAPD分析条件的优化研究
引用本文:赵锦,刘孟军.枣树RAPD分析条件的优化研究[J].果树学报,2001,18(6):329-332.
作者姓名:赵锦  刘孟军
作者单位:河北农业大学中国枣研究中心,
基金项目:教育部留学回国人员基金,河北农业大学9816科技工程资助项目
摘    要:试验通过系统的比较研究,建立了枣树RAPD分析的优化反应条件,即25μL反应体系中含有100mmol/LKCl、8mmol/L(NH4)2SO4、10mmol/LTris—HCl(pH9.0)、Np—40、2.0mmol/LMgCl2、160μmol/LdNTP、15ng引物、30ng模板DNA和1.5UTaqDNA聚合酶。适宜的扩增程序为94℃4min,1个循环;94℃30s、36℃40s、72℃1min,50个循环;72℃8min,1个循环。与不同试验室间获得的RAPD分析最佳反应条件进行比较表明,枣树RAPD分析的最佳反应条件在不同实验室间有很强的一致性,只需对dNTP、引物和TaqDNA聚合酶的用量进行小幅度调整。

关 键 词:枣树  RAPD  分析条件  优化
文章编号:1009-9980-(2001)-06-329-04
修稿时间:2001年3月2日

Optimization on RAPD Analysis System of Chinese Jujube (Ziziphus ju juba Mill.)
Zhao Jin and Liu Mengjun.Optimization on RAPD Analysis System of Chinese Jujube (Ziziphus ju juba Mill.)[J].Journal of Fruit Science,2001,18(6):329-332.
Authors:Zhao Jin and Liu Mengjun
Abstract:The optimized RAPD reaction condition of Chinese jujube was established after systematic study,i.e.in a total volume of25μL,containing100mmol/L KCl ,8mmol/L(NH 4 ) 2 SO 4 ,10mmol/L Tris-HCl (pH9.0),Np-40,2.0mmol/L Mg Cl 2 ,160μmol/L dNTP,15ng primer,30ng template DNA and1.5U Taq DNA polymerase.The amplification procedure of94℃4min,1cycle;94℃30s,36℃40s,72℃1min,50cycles;and72℃8min was suitable to Chinese jujube.The opti-mized RAPD analysis system was very similar to those obtained in other labs,with minor modification of the concentration of dNTP,primer,and Taq DNA poly merase.
Keywords:Chinese jujube  RAPD  Reaction condition  Optimization
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